Medición con el dispositivo e-BQC y obtención de fallos

ERRORES MÁS COMUNES UTILIZANDO EL e-BQC

BAJA REPRODUCIBILIDAD O PRECISIÓN Y MENSAJES DE ERROR

El e-BQC es un dispositivo muy sensible que utiliza la electroquímica para medir la capacidad antioxidante. Esto significa que hay algunos factores a tener en cuenta y buenas prácticas para minimizar la variación al realizar las réplicas y la visualización de los mensajes de error. Estos errores de e-BQC están relacionados principalmente con tres pilares principales:

Tiras e-BQC 

La medida se realiza en las tiras, por lo que es muy importante cuidarlas bien. Las tiras tienen varias partes como se puede ver aquí.

LOS ERRORES

  • Tocar las tiras con las manos sin guantes.
  • Reutilizar la misma tira
  • Arañazos o rallones en el sitio activo
  • Tiras con polvo

LAS SOLUCIONES

  • Use guantes limpios para manipular las tiras y nunca, incluso con guantes limpios, toque el sitio activo, donde se dispone la muestra.
  • Use tiras nuevas para cada medida y nunca use la misma tira para medir varias veces.
  • Mantenga las tiras en el recipiente hasta que se usen, para evitar daños o suciedad.
  • Evite frotar las tiras contra sí mismas o cualquier otro material. No utilice ninguna tira que parezca dañada.
  • Al pipetear las muestras, no toque la superficie de la tira con la punta.
Partes de la tira de medida

MUESTRAS:

Algunas muestras presentaran mayor reproducibilidad que otras ya que depende de su propia composición que determinará su idoneidad para ser medidas con el equipo e-BQC.

LOS ERRORES

  • Composicion lipidica
  • No considerar el pH
  • Muestras heterogéneas
  • Baja conductividad de la muestra
  • Alta viscosidad de la muestra
  • Efecto matriz
  • Alto contenido proteico
  • Componentes interferentes presentes en la muestra

LAS SOLUCIONES

  • Elimine los diluyentes orgánicos o diluya su muestra con un tampón acuoso al menos en una proporción de 1: 2.

  • Para evitar el efecto del pH, es posible que algunas muestras necesiten estandarizar el pH. No compare muestras con valores de pH muy diferentes.

  • Trabajar con muestras homogéneas, si no es posible, tratar de separar las sustancias interferentes. Utilice volúmenes más altos para medir porque tomará una muestra de componentes más representativa.

  • Las muestras con baja conductividad requerirán dilución con un tampón.

  • Para el caso del efecto de matriz se recomienda una calibración. Cuanto menor sea la pendiente del calibrado, mayor será el efecto de la matriz. En la gráfica se traza un calibrado para una muestra de leche.

  • Evite dejar la muestra en la tira durante mucho tiempo, en lugar de eso, mida inmediatamente.

  • Para extractos de proteínas, use un tampón para diluir y probar diferentes concentraciones para optimizar sus resultados. Verificar la presencia de antioxidantes exógenos o añadidos.

Los antioxidantes son sustancias muy sensibles que, debido a sus propiedades especiales, se oxidan con facilidad. Por esta razón, otro factor a tener en cuenta es el manejo de la muestra.

LOS ERRORES

  • Exposición a la luz
  • Exposición al oxigeno
  • Alta temperatura de almacenamiento
  • Largo tiempo de almacenamiento

LAS SOLUCIONES

  • Mantenga sus muestras en recipientes opacos y evite la iluminación directa.

  • Maneje sus muestras con cuidado. No mezcle mediante vórtice a altas velocidades, en su lugar, utilice la inversión y la mezcla con la pipeta. Evite las burbujas al desechar la gota, una forma de hacerlo es no pulsar la segunda parada de la pipeta.

  • Almacene las muestras a bajas temperaturas (entre -80ºC y -20ºC) para garantizar una estabilidad prolongada. Antes de medir, deje que las muestras alcancen la temperatura ambiente. No comparar resultados de muestras con diferentes temperaturas. Evite múltiples ciclos de congelación y descongelación, en su lugar, use partes alícuotas.

  • En la medida de lo posible, utilice muestras recién obtenidas. Si no es posible, almacene a bajas temperaturas (entre -80ºC y -20ºC) y mida cuanto antes mejor. No utilice muestras que se hayan almacenado durante mucho tiempo o que se hayan almacenado de forma inadecuada.

Muestra con interferencias debido al efecto matriz

USO:

Después del manejo de la muestra y las tiras, el siguiente punto para garantizar la reproducibilidad y precisión, es un uso correcto del equipo.

LOS ERRORES MÁS COMUNES

  • Cobertura inadecuada de la tira
  • Volúmenes de muestra demasiado bajos
  • No cambiar las puntas entre medidas.
  • Usar diferentes volúmenes de muestra y comparar los resultados.
  • Burbujas en la gota.
  • Superficie de trabajo móvil / vibrante.
  • Estadísticas engañosas

LAS SOLUCIONES

  • Siga el esquema como guía para una buena cobertura, toda la superficie dentro del protector azul debe contener muestra. Asegúrese de que la zona de control esté completamente cubierta, preferiblemente, comience con esta parte para llenar el sitio activo de la tira.
  • Utilice más de 30 µL de muestra, por ejemplo 50 µL. Si la muestra es muy viscosa, se debe usar más volumen. Si no hay limitación de volumen de muestra, 100 µL garantizan una cobertura completa de la tira.
  • Cambie siempre las puntas entre las muestras para evitar la contaminación cruzada.
  • Sea consistente con el volumen elegido para todas las pruebas a comparar. Para muestras heterogéneas, use volúmenes más altos.
  • Mantenga las tiras en el recipiente hasta que se utilicen para evitar daños. Evite frotar las tiras contra sí mismas o cualquier otro material. No utilice ninguna tira que parezca dañada. Al pipetear las muestras, no toque la superficie de la tira.
  • Evite burbujas al dispensar la gota, una forma de hacerlo es no pulsar la segunda parada de la pipeta. Esto hará que no se dispense la misma cantidad de volumen, pero será el mismo error para cada medición.
  • Asegúrese de que la superficie en la que está trabajando sea lisa, horizontal y estable. No mueva el dispositivo ni la mesa mientras realiza la medición.
  • Utilice estadísticas no relativas.
Cobertura correcta de las tiras

¿Quieres más información? ¡Descarga la guía completa aquí con todas las explicaciones !

¿Prefieres hablar con nosotros? Contacta con nuestro equipo y te ayudaremos.